Qiagen瓊脂糖Ni-NTA Agarose (25 ml) 分子生物試劑
Qiagen瓊脂糖Ni-NTA Agarose (25 ml)
產(chǎn)品特點:利用重力流層析純化His-tagged蛋白
高親和力和高結(jié)合能力
可以選擇在天然或變性條件下純化蛋白
預(yù)先加載的即用型基質(zhì)適合任何規(guī)模的蛋白純化
提供自動純化和檢測的方法
是親合層析用基質(zhì),用于純化帶有His標(biāo)簽的重組蛋白。His標(biāo)簽上的組an酸殘基能高特異性的結(jié)合到固定的鎳離子上。細胞裂解上清液上樣到純化基質(zhì)上,His-tagged蛋白結(jié)合,其他蛋白則流過基質(zhì)。洗滌后,His-tagged蛋白可在天然或變性條件下洗脫。
Qiagen瓊脂糖Ni-NTA Agarose (25 ml)
原理
QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System基于獲得zhuan利的Ni-NTA(氨基三乙酸鎳)樹脂,對含有6個或以上組an酸殘基(連續(xù)或交替)親合標(biāo)簽的蛋白選擇能力強。該技術(shù)可在天然或變性條件下,從所有表達體系中一步純化幾乎所有的His-tagged蛋白。NTA含有四個鎳離子螯合位點,與鎳的結(jié)合能力比其他僅有三個金屬螯合位點的金屬螯合純化方法的結(jié)合能力強。多出的一個螯合位點可防止鎳離子脫落,因此具有更強的結(jié)合能力,蛋白純度比金屬螯合純化方法的蛋白純度高。QIAexpress技術(shù)可用于從桿狀、哺乳動物細胞、酵母和細菌等各種表達體系中純化His-tagged蛋白。
性能
Ni-NTA Agarose中的Ni-NTA與Sepharose CL-6B support偶聯(lián),具有強結(jié)合能力,非特異性結(jié)合少(。這種材料對于多數(shù)的生產(chǎn)規(guī)模和柱純化具有*的可操作性。Ni-NTA Agarose可單獨訂購,也包含在QIAexpress Kits中。QIAexpress Kits是適用于大腸桿菌His-tagged蛋白高效表達和純化的完整試劑盒。
應(yīng)用
基質(zhì)可靠的一步純化得到His-tagged蛋白,適用于多種應(yīng)用,包括:
結(jié)構(gòu)和功能研究
蛋白結(jié)晶,用于三維結(jié)構(gòu)檢測
蛋白與蛋白,蛋白與DNA相互作用研究
抗體制備
純化放大的生產(chǎn)規(guī)模
使用范圍:適用于分子生物學(xué)應(yīng)用。該產(chǎn)品不適用于的診斷、預(yù)防或。
注:更多小規(guī)模離心柱和真空形式質(zhì)粒制備,參見Plasmid Miniprep Kit 選擇指南
1.試劑產(chǎn)量取決于質(zhì)粒拷貝數(shù),插入片段大小、宿主菌、培養(yǎng)基和培養(yǎng)體積。
2.培養(yǎng)體積取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌和培養(yǎng)基